Parsons CL, Proctor J, Teichman JS, Nickel JC, Davis E, Evans R, Zupkas P, Phillips C, Shaw T, Naidu N, Argade S.
Source
Division of Urology, University of California-San Diego, San Diego, USA. cparsons@ucsd.edu
ЦЕЛЬ:
Подтвердить одноцентровое наблюдение, зафиксировавшее снижение сиалирования и аномальное гликозилирование белка Тамм-Хорсфалла у пациентов с интерстициальным циститом по сравнению с контрольной группой.
Материалы и методы:
Были получены образцы мочи от 41 членов контрольной группы и 48 пациентов с интерстициальным циститом из 5 североамериканских центров слепым методом. Белок Тамм-Хорсфалла был выделен из мочи осаждением солями. Содержание белка (нормализованного по креатинину) определяли при помощи объемной хроматографии. Уровень сиаловой кислоты измерялся с помощью 1,2-диамино-4 ,5-метилен диоксибензеновой (Sigma ®) высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуоресцентной детекцией. Нейтральные и аминосахара определялись щелочной анионообменной хроматографией с импульсной амперометрической детекцией. N-гликаны были мечены 2-аминобензамидом и профилированы с использованием щелочной анионообменной хроматографии с флуоресцентным обнаружением. Образцы были также проанализированы спектрометрией MALDI-ToF. Перметилированные N-гликаны были проанализированы в диапазоне отношения массы к заряду от 3000 до 6000.
Результаты:
Не замечено существенной разницы в отношении белка Тамм-Хорсфалла к креатинину у пациентов с интерстициальным циститом против контрольной группы (49,12 против 46,4 мг / г, р = 0,26). Содержание сиаловой кислоты (67 против 77 нмоль / мг белка Тамм-Хорсфалла, р = 0,025) и общее содержание моносахаридов (590,9 против 680,6 нмоль / мг белка Тамм-Хорсфалла, р = 0,003) были значительно снижены у пациентов с интерстициальным циститом против контроля. Результаты подтвердились профилированием и масс-спектрометрией N-гликана 2-аминобензамида, который показал 45%-ное снижение основного тетра-сиалированного пика (отношение массы к заряду 4590) белка Тамм-Хорсфалла у пациентов с интерстициальным циститом по сравнению с контрольной группой.
ВЫВОДЫ:
Данные нашего многоцетрового исследования служат подтверждением того, что у пациентов с интерстициальным циститом возникает аномальное гликозилирование белка Тамм-Хорсфалла, что может играть определенную роль в развитии этого заболевания.
